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    小鼠肺泡上皮細胞提取物

    • 更新時間:  2020-07-06
    • 產品型號:  
    • 簡單描述
    • 小鼠肺泡上皮細胞提取物 現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
    詳細介紹

    培養(yǎng)步驟:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
    1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
    3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
    4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

    小鼠肺泡上皮細胞提取物是從小鼠肺泡上皮細胞提取的,小鼠肺泡上皮細胞從正常小鼠肺組織制備。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
    總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

    cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

    蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠肺泡上皮 組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

    潛在的應用: <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。

    產品名稱

     小鼠肺泡上皮細胞提取物 ?

    英文名稱

    Mouse Lung: Normal Alveolar Epithelial Cell Derivatives

    貨號

    CS-X3649

     


    細胞分類:

    一種:
    是凍存產品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
    第二種:
    是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
    質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
    細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
    1.研究的對象是活細胞
    在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
    2.研究條件可以人為控制
    pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
    3.研究的樣本可以達到比較均一性
    通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
    4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
    采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
    以下是公司正在銷售的相關產品: 

    0.15ng/ml趨化因子C-C-基元配體4樣蛋白1(CCL4L1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)Thermo Scientific™ BL21(DE3) Competent Cells

    9.375pg/ml基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)PYROPHOSPHATASE, INORGANIC

    0.188ng/ml基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTAP THERMOSENSITIVE AP

    46.9pg/ml基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTAP THERMOSENSITIVE AP

    9.375pg/ml滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)FASTAP THERMOSENSITIVE AP

    0.094ng/ml滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)T4 POLYNUCLEOTIDE KINASE

    0.094ng/ml滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)T4 POLYNUCLEOTIDE KINASE

    46.9pg/ml早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)T4 DNA LIGASE

    46.875pg/ml早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)T4 DNA LIGASE

    9.375pg/ml早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試盒(化學發(fā)光免疫分析法)T4 DNA LIGASE, HC
    小鼠肺泡上皮細胞提取物 Flag標簽蛋白裂解液1,2,4-三氯苯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))

    Flag Tag IP/Co-IP Kit/Flag標簽免疫沉淀試盒四氯烯(Standard for GC,≥99.9%(GC))

    Endogenous Enzymes Blocking Buffer/內源性性酶封閉液三酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC))

    Endogenous Enzymes Blocking Buffer/內源性過氧化物酶封閉液三烯四胺(TETA)(Standard for GC)

    EL-4全細胞裂解液1,3,5-三苯(Standard for GC, ≥99.0% (GC))

    EGFP標簽蛋白裂解液三正胺(Standard for GC,≥99.5%(GC))

    eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學發(fā)光檢測試盒1,2,3,4-四氯苯(Standard for GC)

    EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復液, 50x)三醇胺(Standard for GC, ≥99.5% (GC))

    Du145全細胞裂解液十三(Standard for GC,>99%(GC))

    Du145/前列腺癌細胞1,1,1-三氯(包含0.05% C4H8O2 穩(wěn)定,standard for GC,≥99.5%(GC))

    DAB Kit/DAB顯色試盒三(Standard for GC)

    COS/猴腎細胞株叔醇(analytical standard,>99.8%(GC))

    COLO全細胞裂解液十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC))

    Citrate Buffer(100x)/檸檬緩沖液(IHC抗原修復液, 100x)(Standard for GC,>99.7%)

    CHO/中華倉鼠卵巢細胞1,1,2-三氯(standard for GC,≥99.8%(GC))

     


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